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生物质谱维护

2008-12-12点击:547
类型:


 

美国应用生物系统中国公司

刘谦

质谱维修资深工程师

机械泵维护步骤

a. 关掉主机电源,最少15分钟之后,关掉机械泵电源开关;

b. 提高机械泵,在排油孔下方放一器皿(约1容量),打开排油孔,见下图

机械泵维护步骤

c. 当无泵油流出时,拧上排油孔螺栓,加入100mL-200mL新油打开机械泵电源开关(时间不要超过5秒钟),重新打开排油孔螺栓,排出泵内残余的泵油。

d. 拧上排油孔螺栓并上紧。

e. 打开加油孔盖子,添加干净的真空泵油,油面位置约到“MAX”80%处,拧上加油孔盖子,见下图。

f. 连接相关部件并开机械泵,20分钟以后再开主机。

对于机械泵漏油的问题, 主要是Voyager DE Pro 用户, 需要注意仪器散热, 和机械泵密封件的更换.

清洗机械泵滤网

LCMS的机械泵抽气入口处有一个滤网,(TOF 仪器没有)见下图,如果有太多灰尘或颗粒吸附在滤网上,会影响到机械泵性能。如果发现机械泵抽空力量不足,机械泵发热甚至烫手,或者机械泵电流过大,应考虑清洗该滤网。一般情况下,在更换机械泵油时顺便清洗该滤网。

无信号诊断步骤

在需要工程师到达之前,首先说明出现此现象的时间,是正在工作时突然出现,还是一段时间没用仪器,再开机后出现的,在此之前,动了仪器哪些部位,是某些扫描方式没有信号还是都没有信号。

例如MRM无信号,先看Q1,Q3有无,若Q1,Q3有,则通常是Analyst参数设置问题,若无,则继续

如果Voyager 无信号, 先看continuous, Delayed extraction 模式有无信号, 后看Reflector, Linear有无信号.

如果4700, 4800 1kvMSMS,2kvMSMS无信号, 先看Reflector, Linear有无信号,若有, 则通常是参数设置问题.若无,则继续

看有无本底信号,电噪声有无,如有,则可能是离子源或软件问题。

检查真空,Q1 SCAN方式,通常应该0.7-1.2x10-5 torr之间,过好可能是Orifice堵塞,过差则可能是漏气或真空泵有问题 Tof仪器通常在10-7 torr, 如果在10-5 torr以下则可能是真空漏气或真空泵有问题.

电源电压是否超限,UPS显示正常否?

更换或清洗了离子源以后,高压线是否插好到位?喷雾电压设置正确与否?

各路气体压力是否正常,阀门是否打开,加热气开了吗?

LC离子源喷雾针重装后,有无漏气,漏液?液体是否从针外壁流出?

管路有否堵塞,一节一节拆开测试,看通否,喷雾是否均匀,泵压是否过高,通常不接色谱柱,200ul/min流速,压力应不超过数十PSI

进样管及spray tube堵塞:

a. Syringe推:直线喷出——没有堵塞

b. 若堵,取下用50/50甲醇超声清洗

c. 超声仍无效,更换进样管及spray tube

Orifice堵塞:

现象:灵敏度下降或真空度异常的好

处理方法: a. 50/50甲醇清洗orifice外部

b. 不能解决问题时再清洗orifice内部

若为APCI,检查流速是否过低(要接LC,可用三通共用注射泵,应大于200uL/分钟),放电尖端对正方向没有,放电电流是否加上(一般3uA)?

若为APPI,有没有通甲苯?

若为NANOSPRAY,针尖碰开了没有?高压放电烧坏或样品堵塞针尖,外涂金属层被磨掉,加不上高压,需提高喷雾电压才有信号,都要更换新的喷雾针。

TIS:有无气泡,注射针里面,LC流动相管路是否有空气,流速低时多等一会儿,可手推一下注射针,帮助液体快速到达喷雾针。

在工程师指导下用万用表测量各点电压值,判断故障点。

4700, 4800 软件判断无信号故障

如反射模式无信号, 打开4000 series explorer/instrument/hardware monitor 看是否Source1两个电流正常.

不正常则可能高压包或DE box1 需更换.

MS/MS模式无信号, 打开4000 series explorer/instrument/hardware monitor 看是否Source2两个电流正常.

不正常则可能高压包或DE box2 需更换

灵敏度低检查步骤

首先按照无信号处理方法检查。

Orifice 脏也可引起真空变差,当Curtain Gas很高才好,说明脏了,清洗。

机械泵油半年以上没换,或颜色加深,要换油,低于刻度下限,亦要换油,注意要用同型号的油。

管路漏液:样品没有完全进到离子源里。

管路部分堵塞:喷雾时断时续,小流量信号好,大流量信号差。

先调出安装仪器时的PPG等方法,用注射泵SYRINGE PUMP,进PPG看看,质量校准点漂移否,若质量校准不对,造成质量数无法选准,要重新校准仪器。

若注射泵采集PPG强度和质量校准正常,则再看标准品样品,COMPOUND等参数是否正确,质量数是否准确。

然后用Reserpine等标准品,接通LC,如果有手动进样阀,可从此处进样,看FIA有无峰,若无或很弱,则可能是LC及源参数设置问题。

如果正常,则排除MS,再自动进样,看FIA有无峰,若无,则可能是自动进样器问题。

FIA正常,则再继续接上色谱柱采样,判断是色谱柱问题还是流动相问题。

离子化方式是否对路,如非极性物质用ESI效果很差,有机酸采用正离子方式没什么信号。

样品本身的问题,如样品没有完全溶解,浓度不够,所用溶剂与流动相不匹配等。

样品存贮时间过长,保存条件不好,分解或吸附了。

放在自动进样器中的样品小瓶内套管底部有气泡,没取到样品,或针头位置太高,而样品液面太低。

前处理步骤中,标准品、内标样品是否加进,提取过程中有无遗洒。

离子抑制,-改变前处理方法或LC梯度,或换为APCI也可以降低部分离子抑制效应。

离子对质量数输入准确否,有无错误?

重复性差检查步骤

参考前面各步骤

气帘气(Curtain Gas)太低,会有周期性降低现象。

采样时间(Dwell Time)太长,每个色谱峰采样点太少,至少十几点,采样时间太短则噪声太高,信噪比不好。

新色谱柱没有充分平衡,旧色谱柱老化,重新清洗活化,或更换。

离子对的选择有问题,M+Na做为母离子不稳定,子离子若为脱水峰亦不太好。

源温度太高,样品分解。

加样前与标准液分别平行做处理,观察有无区别若标准品溶液无问题,而样品重复性差,则问题可能出在基质的干扰或前处理方法不当。

稀释配制样品的移液枪,移液管,容量瓶等有无污染问题。

某些样品正离子改为负离子试试,干扰少,重复性会好些。

样品管中吸附,尤其低浓度,不成线性,如氨基糖甙,可适当加些甲酸或乙酸。

溶解样品一定要用流动相,如果不同,例如甲醇溶液,流动相是乙腈/水,出峰乱,稀释时残存甲醇都会有影响。

梯度洗脱后平衡时间不够,或脏东西没洗干净,累积使得重复性差,应彻底冲洗柱子。

手动阀如果没问题了,再看自动进样器有无问题。

空调波动,与仪器在同一供电线路上,启动/停止会影响仪器真空,进而影响实验结果。

当液氮剩不多时,及使用钢瓶时,尤其注意压力变化。

流动相虽有在线脱气,但装入瓶后超声还是必要的。

PEEK吸附,FIA时明显,例:四环素,甲醇溶液,乙腈/水:(0.1%乙酸)30/70,由开始时一个峰最后变为两个峰。另外保留时间也会改变,应充分冲洗管路。

处理Analyst通信不上的9个步骤

1Analyst 软件中Hardware configure重新deactivate,activate

2、用CTRL-ALT-DEL,Windows任务管理器结束任务,关掉Analyst 软件,然后重新打开Analyst

3、关掉Analyst 软件,Stop Analystservice后重新打开Analyst软件

4、重新启动控制仪器的电脑及HPLC,activate hardware

5Stop Analystservice后进入Scu21.exe 中, clear GPIB Bus

6 Stop Analystservice后进入Scu21.exe 中, Reset System controller

7(API3000/4000/5000)同时按下电源旁边的两个按扭reset

8、重新开关仪器总电源

9Stop Service后进入Scu21.exe 中,download firmware:M3XXX,M4XXX

说明:一步不行,再使用下一步,不一定9步都需要做完

处理4000 Series Explorer通信不上的4个步骤

1. 在工作软件中用Instrument/reinitialize 重新建立通信.

2. 关掉工作软件, control panel 里的Service 停掉 Instrument Realtime Control.exe

3. 重新启动电脑, 软件登陆后等十分钟再打开工作软件.

4. 重新启动电脑, 并同时重新开关仪器总电源.

如何延长分子泵的寿命

1、喷口离orifice位置尽可能远

2、样品尽可能干净

3、机械泵油经常更换

4、分子泵的散热尽量充分

离子源喷口与orifice的位置的影响:

影响分子泵的寿命;

引起orifice堵塞、skimmerQ0脏;

并不能增加灵敏度,反而使稳定性下降;

API4000/3200/5000/3200Qtrap/4000Qtrap常用的部件号

常用工具列表

十字螺丝刀

一字螺丝刀

大活动扳手(拆装液氮罐上气体减压阀)

小活动扳手

¼-5/16 呆扳手

Peek管切管器

数字式万用表

Kim-wipes无尘纸

1.5-10mm公制内六角扳手

手电筒

无粉尘一次性手套


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