液相色谱系统的日常维护及注意事项（之二）

流动相使用的注意事项

必须使用HPLC级或相当于该级别的流动相，并要先经0.45μm薄膜过滤。
过滤后的流动相必须经过充分脱气，以除去其中溶解的气体（如O2），如不脱气易产生气泡，增加基线噪声，造成灵敏度下降，甚至无法分析。

几中脱气方法比较：
1.氦气脱气法：利用液体中氦气的溶解度比空气低，连续吹氦脱气，效果较好，但成本高。
2.加热回流法：效果较好，但操作复杂，且有毒性挥发污染。
3.抽真空脱气法：易抽走有机相
4.超声脱气法：一种较为常见的脱气法。流动相放在超声波容器中，用超声波震荡10～15分钟，此法效果并不是太好，但操作简单。
如果管路中使用peek树脂部件，请不要使用下列流动相：
浓硫酸、浓硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亚砜

特别注意：
含有缓冲盐溶液的流动相的清洗方法：
1．先用10︰90的甲醇/水冲洗，以洗去缓冲盐，清洗时间至少为一小时。
2．再用90︰10的甲醇/水，冲洗系统，并将系统保存在该流动相中。清洗时间至少为40分钟。

补充参考资料：使用缓冲液的注意事项：

缓冲液可以提供离子平衡的反离子，并使流动相保持一定的离子强度和pH值，减少拖尾。
但是使用缓冲液要注意几点：
1、避免使用盐酸盐，盐酸盐对钢质有腐蚀作用。
2、缓冲液最好要现配现用，往往缓冲液是良好的菌类培养液，隔天或放置长时间实验时会有很多怪现象发生。
3、实验后不可用有机溶剂直接过度，有机溶剂会处使盐类析出，造成液路或色谱柱堵塞，可用95：5的水甲醇冲洗。
4、使用缓冲液要及时掌握pH范围，做到胸中有数。
5、清洗液路和柱子时，有温控可加热到30摄氏度易于冲洗。
6、长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出，若有白色盐类析出，可考虑一定周期用10%硝酸冲洗一下液路（拆下柱子，走30ml,再用5倍水冲洗）可以避免液路的堵塞。
7、选择缓冲液要用可靠的试剂，避免不纯的盐类造成不必要的麻烦。