反相高效液相色谱法测定佐米曲坦薄膜衣片的含量

佐米曲坦(zolmitriptan)是Zeneca公司研制的一种选择性高的5-HTIB／ID受体激动剂，用于急性发作偏头痛的治疗，效果良好。该药于1997年首次在英国上市，商品名为佐米格(Zomig)，现已在美国、德国、丹麦、芬兰、中国等多数国家上市，市场前景看好。由于该药在中国未施行行政保护，军事医学科学院毒物药物研究所于国内首家仿制了该药，现已申报新药证书和生产批件。
    为了配合该药的研发，本文建立了佐米曲坦的反相高效液相色谱测定方法，用于本品的含量测定，为控制该药的质量提供依据。该法准确可靠，操作简单，能够满足新药报批要求。
    1 仪器与试药
    Waters高效液相色谱仪，包括600泵，486UV检测器及色谱工作站。德国R200D Sartorius电子天平；针筒式微孔膜过滤器，规格有机系、水系，φ13 mm，0.45μm。
    佐米曲坦原料药(军事医学科学院毒物药物研究所合成室提供)；佐米曲坦薄膜衣片(军事医学科学院毒物药物研究所制剂室研制)；佐米曲坦对照品(军事医学科学院毒物药物研究所合成室提供，归一法含量>99.5％)。
    乙腈(色谱纯，天津四友)；水为双蒸馏水，三乙胺、三氟醋酸均为分析纯。
    2 色谱条件
    色谱柱为Zorbax SB Cl8(5μm，4.6mm×250mm)；流动相为乙腈-水-三氟醋酸-三乙胺(400：1600：2：0.5)；流速：1.0mL/min；检测波长：225nm；灵敏度：1AUFS；进样量20μL。
在上述色谱条件下，主药佐米曲坦保留时间为6.0 min左右，色谱行为良好。
    3 系统适应性试验
    在上述的色谱条件下，用配制好的20，25，30μg/mL 佐米曲坦对照品溶液分别进样20μL记录色谱图，得主成分色谱峰的保留时间(tR)和半峰高(w)，按佐米曲坦峰计算色谱柱的理论塔板数为64OO。
    4 辅料干扰性试验
    按处方比例配制空白样品，置于100mL量瓶中，加流动相至刻度，振摇，用0.45μm微孔滤膜过滤，弃去初滤液，精取续滤液20μL进样。
    5 线性关系
    精密称取佐米曲坦对照品10mg于100mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精取0.5，1，2，2.5，3，5，10mL于10mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，充分振摇。取20μL进样，记录色谱图，各样品溶液中主药峰面积与进样量C(μg)作图。在0.1～2.0μg范围内时，佐米曲坦进样量与峰面积比值呈良好线性关系，回归方程(n=7)Y=3.74×100000+6.32×1000000X．r =0.9989。
    6 精密度试验
    取佐米曲坦线性关系项下低(20μg/mL )、中(25μg/mL)、高(30μg/mL)3种浓度的溶液，分别连续进样7次，将峰面积进行统计分析，得上述3种进样浓度的精密度依次为：0.4％，0.6％，0.7％(n=7)，方法的精密度良好。
    7 重复性考察
    取佐米曲坦片剂(010801)10片，精密称定，研细，精密称取粉末适量(约相当于佐米曲坦2.5mg)，于100mL量瓶中，照含量测定方法，进样20μL，所得峰面积代人回归方程，求得RSD为0.5％，方法重复性良好。
    8 方法回收率
    分别精密称取佐米曲坦原料药20，25，30mg各3份于100mL量瓶中，加入处方量的其它所有辅料，用流动相溶解并稀释至刻度，充分振摇，用0.45μm微孔滤膜滤过，精取续滤液10mL于100mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液，取20μL进样，记录色谱图；另取佐米曲坦对照品约25.0mg于100mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，充分振摇，精取10mL于100mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得佐米曲坦对照品液，取20μL进样，记录色谱图，对照法计算各样品的检出量，计算回收率，结果表明辅料对测定无干扰，佐米曲坦低、中、高3种浓度的平均回收率分别为100.2％，99.9％，99.7％；RSD分别为0.6％，0.9％，0.7％，该方法准确性可满足新药报批的要求。
    9 样品测定
    按照上述HPLC条件和方法，测定3批佐米曲坦薄膜包衣片剂的含量。可见，经测定的3批样品的标示含量均在95％～105％范围内，RSD小于3.0％，满足新药报批的要求。 
    10 讨论
    该法专一性强，灵敏度高，精密度和回收率均好，完全能够满足制剂质量标准的要求，为控制佐米曲坦的质量提供了可靠的定量方法依据。