儿茶含量（儿茶素，表儿茶素）测定方法

儿茶为豆科植物儿茶Acacia catechu (L.f.)Willd.的去皮枝、干的 煎膏。为2005版《中国药典》一部收载品种。其含量测定方法2005版《中国药典》收载的是高效液相色谱法。文献报道的多为高效液相色谱法，另外，也有薄层扫描法、比色法、分光光度法等。

一、高效液相色谱法（HPLC）
    采用高效液相色谱法测定儿茶素和表儿茶素的含量，色谱条件除药典所载外，现举例常用的几种。
⑴ 2005版药典儿茶含量测定项：
    色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.04mol/L枸橼酸溶液-N，N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃（45：8：2）为流动相；检测波长为280nm；柱温35℃。理论板数按儿茶素峰计算应不低于3000。
    供试品溶液的制备：取本品粉末0.02克，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇-水（1：1）40 ml，超声处理20分钟，并加甲醇-水（1：1）至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

⑵ 杨君等采用HPLC法测定大叶钩藤中表儿茶素的含量。HP1100型高效液相色谱仪（惠普公司）；二极管阵列检测器(DAD)；ODS Hypersil色谱柱(5μm，250mm × 4mm)。流动相为乙腈-甲醇-水-冰乙酸(18：2：79.5：0.5)。药材用50%甲醇超声提取后，加盐酸酸化，醋酸乙酯萃取。结果回归方程为Y=1499X+4302，r=0.9999，线性范围1.26～ 25.15μg。

⑶ 于健东等采用HPLC法测定测定了8种中药材和3种儿茶制荆中儿蔡素、表儿萘素含量。PE LC-200高效液相色谱仪；色谱柱：C18柱(10μm，4.6×150mm；理论塔板数按儿茶素计算大于3O00。流动相：0.04mol／L柠檬酸-N，N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃(45：8：2，v/V)，流速：0.8 mL /min柱温：35℃ 。检测波长：280nm。该方法可以控制儿茶药材及其制剂质量，并有一定的专属性。

⑷邓思珊等采用高效液相色谱法测定了茶多酚中6种儿茶素的含量。岛津LC-4A高效液相色谱仪，SPD-2AS紫外检测器．C-R2AX数据处理机。：色谱柱：Hypersil BDS(4.0mm×150mm，5μm )；流动相：A相为乙腈-2％冰醋酸(2：lOO)，B相为乙腈-2％冰醋酸(30：70)，梯度洗脱，30min内完成。流量：1 ml／min；柱温：36℃ ；检测波长：280nm。相对标准偏差在0.6％ ～3.5％之间，回收率在97％ ～104％之间。

⑸袁吕江更采用高效液相色谱法测定茶叶中儿茶素组分的含量。色谱仪：Waters公司产品。色谱柱μBondapak C18 3.9mm i.d.×300mm。流动相：乙酸-甲醇-N-N-二甲基甲酰胺-水=2 ： 3：35：160；流量梯度洗脱：O-16min为1.5ml／min；16min以后逐渐增至2ml／min；检测波长280nm。样品处理：丙酮水溶液浸泡→正戊烷萃取（除去叶绿素的干扰）→下层液氯仿萃取（除去咖啡碱的干扰），取上层液。

⑹罗晓明高效液相色谱快速测定茶叶中儿茶素的含量。LC- l0高效液相色谱仪(SHIMADZU)；SCL-IOA 紫外可见检测器(SHINADSU)；Alltima C18色谱柱(5μ4.6× 250mm，ATTECH)；CR7A数据处理仪(SHIMADZU)。水-甲醇-乙酸(73.0／23.0／2.0)为流动相．在流速为1.0 mL/min。柱温3O℃。检测波长280nm时等度洗脱分析样品。分析时间仅为25min，线性范围为0.8～ 90 mg/mL (r=0.998～0．999)，回收率为98.2％ ～100.3% ，检测限为5～ l0ng。

    有文献报道由于儿茶素类经长时间加热易氧化，因此宜采用短时间加热、冷程、超声波等提取方法。而且样品配好后应尽快进样，不宜贮存，标准溶液同样不宜贮存。

二、薄层扫描法
    李洁采用薄层扫描法测定孩儿茶中消旋儿茶素的含量日本岛津CX-900双波长薄层扫描仪：展开剂为甲酸：乙酸乙酯：甲醇(4：4：1)，λs=600nm，λR=280nm。狭缝为1.2×1.2mm，光源为D2灯，线性参数S=3其回归方程为：Y=13.25+1031.31X；r=0.9992，在4.0～8.0μg／ml内呈线性，回收率在99.6 -102.8之间，

三、比色法
    金在久等用对二甲氨基苯甲醛，在高氯酸存在下，以比色法测定儿茶胶囊中儿茶素的含量。UV-2201型紫外分光光度计（日本岛津），取样品氯仿-甲醇溶液点样，经制备型薄层层析展开，刮取儿茶素斑点谱带，用乙醇洗脱，加对二甲氨基苯甲醛高氯酸显色剂，离心，取上清液，以显色剂为空白，于550nm波长处测定吸收度。在6.92～41.52μg范围内具有良好的线性关系(r=0.9991)，儿茶素的平均回收率为97.51％ ，复方儿茶胶囊中儿茶素的平均含量为43.2mg／g，RSD为1.19％(n=5)。
    魏毅等采用改良香荚兰素比色法测定茶多酚口古片中儿茶素含量。265型紫外分光光度计(岛津)，120-02紫外分光光度计。方法：样品乙醇液分别加水10mL，1％香荚兰素浓盐酸液加至刻度，摇匀，40min后，于505nm测定吸收度，在7.58～53.05μg线性关系良好(r=0.9998)。

    从以上分析可知，在测定儿茶素和表儿茶素的含量时，上述方法操作都较简单，结果准确。但随着分析仪器的发展，高效液相色谱法以其稳定、可靠、高效的特点，以成为中药研究的重要方法。也有报道用纸色谱法对儿茶素和表儿茶素的含量进行分析，但纸色谱法时间长(30～40小时)，灵敏度低，准确性差，且分析手段繁琐。