液相色谱/质谱法检测奶制品中的三聚氰胺

特点：使用戴安公司最新开发的混合基质柱WAX-1分离被分析物。该色谱柱利用疏水和离子交换混合作用机理来达到特殊的选择性和保留。液相色谱运行时间仅用8分钟，戴安公司的MSQ质谱检测器确保选择性和灵敏度。对于两种物质（2-200 ng/mL）的线性都能达到R2>0.9995。方法检出限（MDL），三聚氰胺为3.97 ng/mL，三聚氰酸为3.32 ng/mL。本检测条件下MSQ质谱检测器的检出限<5 ng/mL。

样品前处理：

试剂准备

1.0%三氯乙酸溶液；0.1 mol/L 盐酸溶液；5%氨水-甲醇溶液： Oasis MCX 固相萃取柱，使用前分别用3 mL甲

醇和3 mL 0.1 mol/L盐酸溶液预处理，并保持柱体湿润。

提取

1、奶粉：

● 称取1.0 g样品（精确到0.01 g）于20 mL离心管中，

● 加入10 mL 1.0%三氯乙酸溶液，再加入0.5 g乙酸锌，

● 混匀后超声15 min，

● 4000 r/min离心5 min，取上清液待净化。

2、牛奶：

● 量取2.0 mL样品（精确到0.1 mL）于20 mL离心管中，

● 加入8 mL 1.0%三氯乙酸溶液，

● 再加入0.5 g乙酸锌，

● 旋涡混匀2 min，

● 4000 r/min离心5 min，上清液待净化。

净化

取上述上清液5.0 mL，以1～2 mL/min的速度过MCX固相萃取柱，再用2.0 mL水、0.5 mL甲醇依次淋洗固相萃取柱，弃去流出液，在15 mmHg以下减压抽1 min使柱体干涸；用3.0 mL 5%氨水-甲醇溶液洗脱，洗脱液于氮吹仪浓缩至近干（温度低于45℃），

仪器

戴安Summit HPLC或U3000液相色谱系统：

自动进样器

柱温箱

戴安MSQ Plus单四极质谱检测器，ESI源

Chromeleon变色龙软件

色谱条件

分析柱：戴安公司Acclaim 混合基质柱WAX-1（150×2.1 mm,5 μm）

淋洗液：等度90%乙腈/10% 20mM pH4醋酸铵缓冲液（v/v）

流速：0.25 mL/min

柱温：20℃

进样量：5 μL

MSQ质谱条件

分析模式：SIM带极性切换

锥孔电压：50 V

间隔时间：0.5 S，对于所有SIM通道

探针温度：500℃

扫描：4 SIM全程扫描（每次500 ms），两个不同极性的全扫描

（100-400 m/z,250 ms）分析物及内标结果见表和色谱图。