HPLC法测定桂枝配方颗粒中桂皮醛的含量

1.仪器与试剂

Agilent 1100高效液相色谱仪，包括：Agilent G1311A四元泵，Agilent G1379A 真空在线脱气机，Agilent G1314A-WD（紫外检测器），Agilent chimstation system(安捷伦化学工作站)，Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm)；电子天平（BP211D）；超声提取器（CQ-25-6,上海）。

桂皮醛对照品（中国药品生物制品检定所提供，0710-9609）；桂枝配方颗粒，批号分别为0502088、0506127、0509154（广东一方制药有限公司提供）；乙腈（色谱纯）；水（超纯水）；其余试剂均为分析纯。

2.方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱（4.6mm×150mm，5μm）；流动相：乙腈-水（35：65）；流速：0.8ml/min；检测波长：290nm；柱温为室温（26℃）；进样量：10μl。

2.2对照品溶液的制备

精密称取桂枝醛对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含27.43μg的溶液，即得。

2.3供试品溶液的制备

取本品粉末约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30min放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜（0.45m）滤过，即得供试品溶液。

2.4线性关系的考察

精密吸取上述桂皮醛对照品溶液2、4、6、8、10μl进样，并以进样量（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程：Y=11338.424X+28.954，r=0.9994。表明桂皮醛在0.05486~0.2743μg的范围内与其色谱峰面积积分值呈良好的线性关系。

2.5精密度试验

分别精密吸取27.43μg/ml的桂皮醛对照品溶液，连续5次进样，测定其峰面积，测定其峰面积积分值基本一致，RSD=0.63%。

2.6稳定性试验

取同一供试品溶液。分别于0、2、4、6、8、10h进样测定，结果10h内测定结果稳定。

2.7重复性考察

取同一批（0509154）样品，分别制备5份供试品溶液，按上述含测方法测定桂皮醛含量；结果桂皮醛的平均含量为0.056%，RSD=0.82%（n=5）。结果表明本方法重现性较好。

2.8回收率试验

采用加样回收法，取已知含量的桂枝配方颗粒粉末样品5份，分别精密添加一定量的桂皮醛对照品，按供试品的制备与测定方法在上述色谱条件下进行含量测定，测得数据见表1.

2.9样品测定

按上述色谱条件与方法测定以下3各批号样品，测定结果见表2.

3讨论

3.1 采用HPLC法鉴别和测定桂枝中桂皮醛的含量文献报道较少，药典只对桂枝进行显微和薄层色谱鉴别。本文参考文献中肉桂药材中桂皮醛的含量测定方法进行色谱条件和提取条件摸索研究。通过对其色谱条件的流速和流动相的改变，最后确定流动相为乙腈-水（35：65）配比，流速为0.8ml/min比较好，其分离度R为7.8，达到含量测定R需大于1.5的要求，且无其他成分的干扰。

3.2对提取条件进行摸索试验，发现采用甲醇超声提取杂质干扰少，样品处理简单，测定数据重现性好，检测成本低。