生物质谱维护

　

美国应用生物系统中国公司

刘谦

质谱维修资深工程师

机械泵维护步骤

a. 关掉主机电源，最少15分钟之后，关掉机械泵电源开关；

b. 提高机械泵，在排油孔下方放一器皿（约1升容量），打开排油孔，见下图

机械泵维护步骤

c. 当无泵油流出时，拧上排油孔螺栓，加入100mL-200mL新油打开机械泵电源开关（时间不要超过5秒钟），重新打开排油孔螺栓，排出泵内残余的泵油。

d. 拧上排油孔螺栓并上紧。

e. 打开加油孔盖子，添加干净的真空泵油，油面位置约到“MAX”80%处，拧上加油孔盖子，见下图。

f. 连接相关部件并开机械泵，20分钟以后再开主机。

对于机械泵漏油的问题, 主要是Voyager DE Pro 用户, 需要注意仪器散热, 和机械泵密封件的更换.

清洗机械泵滤网

在LCMS的机械泵抽气入口处有一个滤网，(TOF 仪器没有)见下图，如果有太多灰尘或颗粒吸附在滤网上，会影响到机械泵性能。如果发现机械泵抽空力量不足，机械泵发热甚至烫手，或者机械泵电流过大，应考虑清洗该滤网。一般情况下，在更换机械泵油时顺便清洗该滤网。

无信号诊断步骤

● 在需要工程师到达之前，首先说明出现此现象的时间，是正在工作时突然出现，还是一段时间没用仪器，再开机后出现的，在此之前，动了仪器哪些部位，是某些扫描方式没有信号还是都没有信号。

● 例如MRM无信号，先看Q1,Q3有无，若Q1,Q3有，则通常是Analyst参数设置问题，若无，则继续

● 如果Voyager 无信号, 先看continuous, Delayed extraction 模式有无信号, 后看Reflector, Linear有无信号.

● 如果4700, 4800 1kvMSMS,2kvMSMS无信号, 先看Reflector, Linear有无信号,若有, 则通常是参数设置问题.若无，则继续

● 看有无本底信号，电噪声有无,如有,则可能是离子源或软件问题。

● 检查真空,Q1 SCAN方式,通常应该0.7-1.2x10-5 torr之间,过好可能是Orifice堵塞,过差则可能是漏气或真空泵有问题 。 Tof仪器通常在10-7 torr, 如果在10-5 torr以下则可能是真空漏气或真空泵有问题.

● 电源电压是否超限，UPS显示正常否？

● 更换或清洗了离子源以后，高压线是否插好到位？喷雾电压设置正确与否?

● 各路气体压力是否正常，阀门是否打开，加热气开了吗？

● LC离子源喷雾针重装后，有无漏气，漏液？液体是否从针外壁流出？

● 管路有否堵塞，一节一节拆开测试，看通否，喷雾是否均匀，泵压是否过高，通常不接色谱柱，200ul/min流速，压力应不超过数十PSI。

进样管及spray tube堵塞：

a. 用Syringe推：直线喷出——没有堵塞

b. 若堵，取下用50水/50甲醇超声清洗

c. 超声仍无效,更换进样管及spray tube

Orifice堵塞：

现象：灵敏度下降或真空度异常的好

处理方法： a. 50水/50甲醇清洗orifice外部

b. 不能解决问题时再清洗orifice内部

● 若为APCI,检查流速是否过低（要接LC，可用三通共用注射泵,应大于200uL/分钟），放电尖端对正方向没有，放电电流是否加上(一般3uA)?

● 若为APPI,有没有通甲苯？

● 若为NANOSPRAY,针尖碰开了没有?高压放电烧坏或样品堵塞针尖,外涂金属层被磨掉,加不上高压,需提高喷雾电压才有信号，都要更换新的喷雾针。

● TIS源:有无气泡，注射针里面，LC流动相管路是否有空气，流速低时多等一会儿，可手推一下注射针，帮助液体快速到达喷雾针。

● 在工程师指导下用万用表测量各点电压值，判断故障点。

4700, 4800 软件判断无信号故障

● 如反射模式无信号, 打开4000 series explorer/instrument/hardware monitor 看是否Source1两个电流正常.

● 不正常则可能高压包或DE box1 需更换.

● 如MS/MS模式无信号, 打开4000 series explorer/instrument/hardware monitor 看是否Source2两个电流正常.

● 不正常则可能高压包或DE box2 需更换

灵敏度低检查步骤

● 首先按照无信号处理方法检查。

● Orifice 脏也可引起真空变差，当Curtain Gas很高才好，说明脏了，清洗。

● 机械泵油半年以上没换，或颜色加深,要换油，低于刻度下限，亦要换油，注意要用同型号的油。

● 管路漏液:样品没有完全进到离子源里。

● 管路部分堵塞:喷雾时断时续,小流量信号好,大流量信号差。

● 先调出安装仪器时的PPG等方法，用注射泵SYRINGE PUMP，进PPG看看，质量校准点漂移否,若质量校准不对，造成质量数无法选准，要重新校准仪器。

● 若注射泵采集PPG强度和质量校准正常，则再看标准品样品，COMPOUND等参数是否正确，质量数是否准确。

● 然后用Reserpine等标准品，接通LC，如果有手动进样阀，可从此处进样，看FIA有无峰，若无或很弱，则可能是LC及源参数设置问题。

● 如果正常，则排除MS，再自动进样，看FIA有无峰，若无，则可能是自动进样器问题。

● 若FIA正常，则再继续接上色谱柱采样，判断是色谱柱问题还是流动相问题。

● 离子化方式是否对路，如非极性物质用ESI效果很差，有机酸采用正离子方式没什么信号。

● 样品本身的问题，如样品没有完全溶解，浓度不够，所用溶剂与流动相不匹配等。

● 样品存贮时间过长，保存条件不好，分解或吸附了。

● 放在自动进样器中的样品小瓶内套管底部有气泡，没取到样品，或针头位置太高，而样品液面太低。

● 前处理步骤中，标准品、内标样品是否加进，提取过程中有无遗洒。

● 离子抑制，-改变前处理方法或LC梯度，或换为APCI也可以降低部分离子抑制效应。

● 离子对质量数输入准确否，有无错误？

重复性差检查步骤

● 参考前面各步骤

● 气帘气(Curtain Gas)太低，会有周期性降低现象。

● 采样时间(Dwell Time)太长，每个色谱峰采样点太少，至少十几点，采样时间太短则噪声太高，信噪比不好。

● 新色谱柱没有充分平衡，旧色谱柱老化，重新清洗活化，或更换。

● 离子对的选择有问题,如M+Na做为母离子不稳定,子离子若为脱水峰亦不太好。

● 源温度太高，样品分解。

● 加样前与标准液分别平行做处理，观察有无区别，若标准品溶液无问题，而样品重复性差，则问题可能出在基质的干扰或前处理方法不当。

● 稀释配制样品的移液枪，移液管，容量瓶等有无污染问题。

● 某些样品正离子改为负离子试试,干扰少，重复性会好些。

● 样品管中吸附，尤其低浓度,不成线性,如氨基糖甙,可适当加些甲酸或乙酸。

● 溶解样品一定要用流动相，如果不同，例如甲醇溶液，流动相是乙腈/水，出峰乱，稀释时残存甲醇都会有影响。

● 梯度洗脱后平衡时间不够，或脏东西没洗干净，累积使得重复性差，应彻底冲洗柱子。

● 手动阀如果没问题了，再看自动进样器有无问题。

● 空调波动，与仪器在同一供电线路上，启动/停止会影响仪器真空，进而影响实验结果。

● 当液氮剩不多时，及使用钢瓶时，尤其注意压力变化。

● 流动相虽有在线脱气，但装入瓶后超声还是必要的。

● PEEK吸附，FIA时明显，例：四环素，甲醇溶液，乙腈/水：（0.1%乙酸）30/70，由开始时一个峰最后变为两个峰。另外保留时间也会改变，应充分冲洗管路。

处理Analyst通信不上的9个步骤

1、Analyst 软件中Hardware configure重新deactivate,再activate

2、用CTRL-ALT-DEL,Windows任务管理器结束任务,关掉Analyst 软件,然后重新打开Analyst

3、关掉Analyst 软件，Stop Analystservice后重新打开Analyst软件

4、重新启动控制仪器的电脑及HPLC,再activate hardware

5、Stop Analystservice后进入Scu21.exe 中， clear GPIB Bus

6 Stop Analystservice后进入Scu21.exe 中， Reset System controller

7、(API3000/4000/5000)同时按下电源旁边的两个按扭reset

8、重新开关仪器总电源

9、Stop Service后进入Scu21.exe 中，download firmware:M3XXX,M4XXX

说明：一步不行，再使用下一步，不一定9步都需要做完

处理4000 Series Explorer通信不上的4个步骤

1. 在工作软件中用Instrument/reinitialize 重新建立通信.

2. 关掉工作软件, 用control panel 里的Service 停掉 Instrument Realtime Control.exe

3. 重新启动电脑, 软件登陆后等十分钟再打开工作软件.

4. 重新启动电脑, 并同时重新开关仪器总电源.

如何延长分子泵的寿命

● 1、喷口离orifice位置尽可能远

● 2、样品尽可能干净

● 3、机械泵油经常更换

● 4、分子泵的散热尽量充分

离子源喷口与orifice的位置的影响：

● 影响分子泵的寿命；

● 引起orifice堵塞、skimmer及Q0脏；

● 并不能增加灵敏度，反而使稳定性下降；

API4000/3200/5000/3200Qtrap/4000Qtrap常用的部件号

常用工具列表

● 十字螺丝刀

● 一字螺丝刀

● 大活动扳手（拆装液氮罐上气体减压阀）

● 小活动扳手

● ¼-5/16 呆扳手

● Peek管切管器

● 数字式万用表

● Kim-wipes无尘纸

● 1.5-10mm公制内六角扳手

● 手电筒

● 无粉尘一次性手套