莱伯泰科：SPE 1000-MV5-GC法测定大葱中11种有机磷

　

随着人们生活水平的提高，营养丰富的蔬菜水果在人们日常饮食生活中的比重越来越大，与人类的健康联系就愈加紧密。近年来在农业生产过程中农民为防治病虫害，大量使用高毒高效农药，导致农产品中农药残留严重超标，不但危害人们的身体健康，而且影响农产品出口创汇。

　　有机磷农药因其高效、溶解性好、易被水解、在环境中能很快地降解而被广泛地用于农业生产中，使虫害得到了有效的控制，极大地提高了农作物的产量。然而，农药也是对人畜有毒的化学品，易对环境造成污染，在农作物中残留后存在着潜在的慢性毒性和对生态环境的影响。因此对食物中的农药残留进行监控检测对食品安全是十分重要的工作。

　　本文参照“GB 23200.8-2016 食品安全国家标准 水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定 气相色谱-质谱法”，以大葱为例建立了水果和蔬菜中有机磷的检测方法，该方法用乙腈提取大葱中的有机磷，然后用SPE1000和MV5组合进行固相萃取和浓缩，最后用气相色谱检测。该方法方便快捷且具有较好的回收率和平行性，适用于水果和蔬菜中有机磷的检测。

　　关键词：SPE1000 MV5 有机磷 GB 23200.8-2016

　　1.实验过程

　　1.1仪器与试剂

　　SPE1000全自动固相萃取系统（莱伯泰科公司）；

　　气相色谱7890B（安捷伦公司）；

　　MV5多通道平行浓缩系统（莱伯泰科公司）；

　　有机磷标准溶液：100μg/mL （水胺硫磷，敌敌畏，甲拌磷，甲基毒死蜱，乐果，毒死蜱，甲基对硫磷，倍硫磷，马拉硫磷，对硫磷，喹硫磷）；

　　丙酮（色谱纯，Fisher）；

　　正己烷（色谱纯，Fisher）；

　　乙腈（色谱纯，Fisher）；

　　甲苯（分析纯，北京试剂厂）；

　　氯化钠（分析纯，北京试剂厂）；

　　无水硫酸钠（分析纯，北京试剂厂）；

　　固相萃取柱：LabTech CARB/NH2 500/500 mg/ 6 mL ；

　　LabTech C18 500 mg/ 6 mL 。

　　1.2 标准贮备液的配置

　　标准贮备液：分别取水胺硫磷，敌敌畏，甲拌磷，甲基毒死蜱，乐果，毒死蜱，甲基对硫磷，倍硫磷，马拉硫磷，对硫磷，喹硫磷标液各50μL加入10mL棕色容量瓶中，用丙酮正己烷（1/1）定容配置成0.5μg/mL标准贮备液。

　　1.3 实验过程

　　1.3.1 提取

　　将大葱打碎，称取20g试样（精确至0.01g）于100mL离心管中，加入40mL乙腈，用均质器在15000 r/min匀浆提取1min，加入5g氯化钠，再匀浆提取1min，将离心管放入离心机，在3000 r/min离心5min，取上清液20mL（相当于10g试样量），待净化。

　　1.3.2 全自动固相萃取浓缩过程

　　(1) 在样品中加入100μL标准贮备液，放入SPE1000样品架上，并装上C18固相萃取柱按图1方法进行第一步净化，用60mL收集管收集；

　　(2) 将（1）中收集管取出放入MV5中氮吹浓缩至2mL后，取出收集管放入SPE1000上样架上，并装上CARB/NH2固相萃取柱，按图2方法进行第二步净化，用60mL收集管收集；

　　（3）将（2）中收集管取出放入MV5中氮吹浓缩至近干后用用丙酮正己烷（1/1）定容到1mL，待检测。

图1 大葱中11种有机磷C18固相萃取方法

图2 大葱中11种有机磷CARB/NH2固相萃取方法

　　1.3.3 GC气相色谱分析

　　气相色谱条件：FPD检测器；色谱柱：HP-5，250μm*0.25μm*30m；进样口温度：290℃，不分流进样；柱温：40℃保持1min，以30℃/min升至130℃，保持0min，以5℃/min升至250℃，保持0min，以10℃/min升至300℃，保持5min；柱流速：1.0mL/min；进样量：1.0μL。

　　2.加标回收率结果

　　2.1 11种有机磷标样色谱图

　　图3为11种有机磷标样的色谱图。

图3 11种有机磷气相色谱图

　　2.2加标样品色谱图

　　图4为加标样品的色谱图，图5为空白样品色谱图。得到的加标回收率及平行性结果详见3.3。

图4 加标样品色谱图

图5 样品色谱图

　　2.3加标回收率结果

　　通过计算得到该方法中11种有机磷的加标回收率及平行性结果（见表1）。11种有机磷的加标回收率为80.2~119.5%，重复性RSD 为1.73~8.04%。

　　表1 11种有机磷样品加标回收测定结果

标样	添加量（μg/kg）	回收率（%）				平均值（%）	RSD（%）
		1	2	3	4
水胺硫磷	50	80.2	83.0	83.9	81.4	82.1	2.01
敌敌畏	50	84.3	88.0	101.0	94.8	92.0	8.04
甲拌磷	50	86.2	83.6	81.8	82.4	83.5	2.33
甲基毒死蜱	50	88.9	91.9	96.1	95.6	93.1	3.63
乐果	50	114.9	119.5	117.3	119.0	117.7	1.76
毒死蜱	50	84.5	86.7	90.6	89.9	87.9	3.24
甲基对硫磷	50	91.2	95.3	97.8	98.7	95.8	3.51
倍硫磷	50	85.4	86.7	88.4	88.6	87.3	1.73
马拉硫磷	50	94.5	99.2	101.8	101.9	99.4	3.49
对硫磷	50	86.9	87.9	90.6	89.7	88.8	1.89
喹硫磷	50	88.8	88.3	91.4	91.6	90.0	1.91

　　3.结果与讨论

　　本方法用SPE1000全自动固相萃取系统与MV5多通道平行浓缩系统连用，对大葱中11种有机磷进行萃取净化，其加标回收率80.2~119.5%，重复性RSD为1.73~8.04%。在萃取和浓缩过程中，上样管、收集管和浓缩管是通用的，不需要液体转移，减少损失，便于操作，说明SPE1000与MV5联用适用于蔬菜水果中有机磷的检测，操作过程简便并且在回收率和平行性上表现优异。

仪器参考

• ASE350快速溶剂萃取仪
• L-3000二元高压自动进样液相色谱系统
• APLE-1000快速溶剂萃取仪
• QuantStudio 3全新实时荧光定量PCR系统
• K1100全自动定氮仪

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