用离子色谱法测定抗生素药物中N-甲基吡咯烷的含量
摘要 用离子色谱法成功地取代液想色谱法而建立了测定Cefepime抗抗生素药物中N-甲基吡咯烷含量的新方法。用DX-120离子色谱仪，以50mmol/L甲基磺酸为流动相，可测定药物中N-甲基吡咯烷含量。对同意样品分析六次，其面积的相对标准偏差小于1.0%。标准曲线的相关系数=0.9996。
关键词 N-甲基吡咯烷 离子色谱法 测定方法
N-甲基吡咯烷是制造Cefepime抗生素药物的一种原料。在制成的药物产品中它作为一种杂质存在，规定其残留量不能过0.5%目前对它的测定是采用液相色谱法，在该方法中采用稀硝酸（64+1000）990mml加10ml，乙腈作为流动相。由于稀硝酸作为流动相有可能队对液相色谱的部件造成腐蚀，所以选择一种更适宜的分离测试方法是十分必要的。离子色谱法目前是在无机和有机阴、阳离子分析中起重要作用的分析技术，它除了测定部分常见的无机阴、阳离子外，还可测定有机胺离子，并且离子色谱仪的分离柱及传送流动相的导管均又耐酸、碱的工程塑料PEEK材料组成，无酸腐蚀的问题，因此，能否使用离子色谱作为测定方法是值得探索的。本文探讨了用DX120离子色谱仪测定N-甲基吡咯烷含量的实验方法。并用同意样品分析6次，其峰面积的相对偏差小于1.0%,优于文献报道的相对偏差4.0%的结果。
另外本文还讨论了该方法的标准溶液相关系数的测定，对实际样品进行了测试，并得出了测定结果。
1.仪器与试剂
DX-120离子色谱仪（美国戴安）
色谱操作条件
流动相：50mmol/L甲基磺酸
流速：1.0ml/min
分离柱（Ion Pac CS12A）：填充表面磺化的薄壳型苯乙烯-二乙烯苯阳离子交换树脂
抑制器：（CSRS-ULTRA）
检测器：颠倒检测器
N-甲基吡咯烷标准样品（100.0%）
Cefepime抗生素药品（已知其中N-甲基吡咯烷含量小于0.5%）
硝酸（A.R.）
甲基磺酸（C.P.）
2.实验方法
2.1实验方法依据
在酸性介质中N-甲基吡咯烷可转变为胺离。其反应式为：
这就为使用离子色谱发测定其含量提供了理论依据。
2.2相关系数的测定
取30ml水加入到100ml容量瓶中，准确称量至0.0002克，滴加定量用的N-甲基吡咯烷标准样品约125mg, (准确程至0.0002克)，加水至100ml，摇匀。用移液管分别移取此液1.00ml, 2.00ml, 3.00ml, 4.00ml, 5.00ml 于5个100ml容量瓶中，用稀硝酸（64+100,000），稀释至刻度。将上述液分别注入离子色谱仪中，由打印机绘出色谱图，并给出峰面值。
2.3相对标准偏差（RSD）的测定
取上述约125mg/100ml标准溶液4.00ml于100ml容量量瓶中，用（64+100，000）HNO3稀释至刻度，将上述溶液注入离子色谱仪，由打印机绘出色谱图，并给出峰面积数值，重复进样6次。
2.4实际样品的测定
2.4.1 N-甲基吡咯烷标准样品峰面积的测定
取越125mg/100ml N-甲基吡咯烷标准溶液4.00ml于100ml容量瓶中，用（64+100，000）HNO3稀释至刻度，将上述溶液注入离子色谱仪，由打印机绘出色谱图，并给出标准样品峰面积数值A。
2.4.2 实际样品的测定。
称取样品约100mg(准确称准至0.0002克)于10ml容量瓶，用（64+100，000）HNO3稀释至刻度，摇匀，注入离子色谱仪，由打印机绘出色谱图，并给出实际样品的峰面积数值Ar
3.结果与讨论
3.1 相关系数的测定结果见表1
表1 相关系数测定结果
标准溶液体积（ml） 峰面积
1 368251
2 688080
3 1014789
4 1356343
5 1720870
经计算，相关系数=0.99964
3.2 相关标准偏差（RSD）的测定结果见表2
表2 相对标准偏差测定结果
实验次数 峰面积
1 1356343
2 1380515
3 1378527
4 1387577
5 1391078
6 1371867
经计算，相对标准偏差=0.84%
3.3样品的测定结果见表3
3.3.1标准溶液的峰面积（AS）:1302563
标准样品的称样量（ms）:131.4mg
3.3.2样品的峰面积（Ar）及样品的称样量（mr）见表3
表3 样品的测定结果
序号 样品的峰面积(Ar) 样品称样量 N-甲基吡咯烷含量
1 671047 97.9mg 0.3%
2 572117 97.7mg 0.2%
3 417001 97.9mg 0.2%
计算公式：
N-甲基吡咯烷量（%）=Ar/AS×ms/mr×4/1000×100式中：
As：标准溶液的峰面积
Ar：被测样品的峰面积
ms：标准样品的质量，mg
mr：被测样品的质量，mg
由以上结果可以看出：
1.用D-120离子色谱仪测定抗生素药品中N-甲基吡咯烷的含量是可行的。用上述条件测定的药品中的N-甲基吡咯烷的含量
为0.2~0.3%, 符合产品的要求。
2.由于离子色谱的分离柱、保护柱及淋洗液流经的导管均由耐
3.本实验分离柱中填充的是由苯乙烯-二乙烯苯组成的阳离子交换树脂，不同于文献介绍的亲水性硅胶。
4.本实验的流动相为50mmol/l的甲基磺酸也不同于文献介绍的（64+100，00）HNO3加乙腈。
5.与文献相比较，相对标准偏差为0.84%, 明显优于文献4.0%的数值
6.在线形回归中，本实验的相关系数=0.9996，表明5个点几乎在一条直线上，而文献中则没有报道是否测定了相关系数。
关键词 N-甲基吡咯烷 离子色谱法 测定方法
N-甲基吡咯烷是制造Cefepime抗生素药物的一种原料。在制成的药物产品中它作为一种杂质存在，规定其残留量不能过0.5%目前对它的测定是采用液相色谱法，在该方法中采用稀硝酸（64+1000）990mml加10ml，乙腈作为流动相。由于稀硝酸作为流动相有可能队对液相色谱的部件造成腐蚀，所以选择一种更适宜的分离测试方法是十分必要的。离子色谱法目前是在无机和有机阴、阳离子分析中起重要作用的分析技术，它除了测定部分常见的无机阴、阳离子外，还可测定有机胺离子，并且离子色谱仪的分离柱及传送流动相的导管均又耐酸、碱的工程塑料PEEK材料组成，无酸腐蚀的问题，因此，能否使用离子色谱作为测定方法是值得探索的。本文探讨了用DX120离子色谱仪测定N-甲基吡咯烷含量的实验方法。并用同意样品分析6次，其峰面积的相对偏差小于1.0%,优于文献报道的相对偏差4.0%的结果。
另外本文还讨论了该方法的标准溶液相关系数的测定，对实际样品进行了测试，并得出了测定结果。
1.仪器与试剂
DX-120离子色谱仪（美国戴安）
色谱操作条件
流动相：50mmol/L甲基磺酸
流速：1.0ml/min
分离柱（Ion Pac CS12A）：填充表面磺化的薄壳型苯乙烯-二乙烯苯阳离子交换树脂
抑制器：（CSRS-ULTRA）
检测器：颠倒检测器
N-甲基吡咯烷标准样品（100.0%）
Cefepime抗生素药品（已知其中N-甲基吡咯烷含量小于0.5%）
硝酸（A.R.）
甲基磺酸（C.P.）
2.实验方法
2.1实验方法依据
在酸性介质中N-甲基吡咯烷可转变为胺离。其反应式为：
这就为使用离子色谱发测定其含量提供了理论依据。
2.2相关系数的测定
取30ml水加入到100ml容量瓶中，准确称量至0.0002克，滴加定量用的N-甲基吡咯烷标准样品约125mg, (准确程至0.0002克)，加水至100ml，摇匀。用移液管分别移取此液1.00ml, 2.00ml, 3.00ml, 4.00ml, 5.00ml 于5个100ml容量瓶中，用稀硝酸（64+100,000），稀释至刻度。将上述液分别注入离子色谱仪中，由打印机绘出色谱图，并给出峰面值。
2.3相对标准偏差（RSD）的测定
取上述约125mg/100ml标准溶液4.00ml于100ml容量量瓶中，用（64+100，000）HNO3稀释至刻度，将上述溶液注入离子色谱仪，由打印机绘出色谱图，并给出峰面积数值，重复进样6次。
2.4实际样品的测定
2.4.1 N-甲基吡咯烷标准样品峰面积的测定
取越125mg/100ml N-甲基吡咯烷标准溶液4.00ml于100ml容量瓶中，用（64+100，000）HNO3稀释至刻度，将上述溶液注入离子色谱仪，由打印机绘出色谱图，并给出标准样品峰面积数值A。
2.4.2 实际样品的测定。
称取样品约100mg(准确称准至0.0002克)于10ml容量瓶，用（64+100，000）HNO3稀释至刻度，摇匀，注入离子色谱仪，由打印机绘出色谱图，并给出实际样品的峰面积数值Ar
3.结果与讨论
3.1 相关系数的测定结果见表1
表1 相关系数测定结果
标准溶液体积（ml） 峰面积
1 368251
2 688080
3 1014789
4 1356343
5 1720870
经计算，相关系数=0.99964
3.2 相关标准偏差（RSD）的测定结果见表2
表2 相对标准偏差测定结果
实验次数 峰面积
1 1356343
2 1380515
3 1378527
4 1387577
5 1391078
6 1371867
经计算，相对标准偏差=0.84%
3.3样品的测定结果见表3
3.3.1标准溶液的峰面积（AS）:1302563
标准样品的称样量（ms）:131.4mg
3.3.2样品的峰面积（Ar）及样品的称样量（mr）见表3
表3 样品的测定结果
序号 样品的峰面积(Ar) 样品称样量 N-甲基吡咯烷含量
1 671047 97.9mg 0.3%
2 572117 97.7mg 0.2%
3 417001 97.9mg 0.2%
计算公式：
N-甲基吡咯烷量（%）=Ar/AS×ms/mr×4/1000×100式中：
As：标准溶液的峰面积
Ar：被测样品的峰面积
ms：标准样品的质量，mg
mr：被测样品的质量，mg
由以上结果可以看出：
1.用D-120离子色谱仪测定抗生素药品中N-甲基吡咯烷的含量是可行的。用上述条件测定的药品中的N-甲基吡咯烷的含量
为0.2~0.3%, 符合产品的要求。
2.由于离子色谱的分离柱、保护柱及淋洗液流经的导管均由耐
3.本实验分离柱中填充的是由苯乙烯-二乙烯苯组成的阳离子交换树脂，不同于文献介绍的亲水性硅胶。
4.本实验的流动相为50mmol/l的甲基磺酸也不同于文献介绍的（64+100，00）HNO3加乙腈。
5.与文献相比较，相对标准偏差为0.84%, 明显优于文献4.0%的数值
6.在线形回归中，本实验的相关系数=0.9996，表明5个点几乎在一条直线上，而文献中则没有报道是否测定了相关系数。
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