参蓉壮骨胶囊的薄层色谱鉴别

　　　【摘要】目的建立参蓉壮骨胶囊的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对方中的当归、三七进行定性鉴别。结果薄层色谱斑点清晰，阴性对照无干扰，耐用性良好。结论薄层色谱法简单、易行，专属性强，重现性好，可对参蓉壮骨胶囊进行定性鉴别。

　　【关键词】参蓉壮骨胶囊薄层色谱鉴别

　　参蓉壮骨胶囊(批件号：YZL-2009-004)为广东省英德市中医院自拟处方制剂，由当归、三七、党参、白芍、独活、枸杞子、巴戟等多味中药组成，具有补益肝肾、强壮筋骨、祛风除湿等功效，用于骨伤恢复期，经英德市中医院使用多年，疗效确切。2009年经广东省食品药品监督管理局批准，同意进行临床试验。为制订制剂质量标准，本试验在参考2005年版《中国药典》(一部)的文献基础上，对制剂中的当归、三七进行薄层色谱定性鉴别研究。

　　1材料

　　当归对照药材(批号120927-200310)、三七皂苷R1对照品(批号110745-200313)、人参皂苷Rb1对照品(批号110704-200319)、人参皂苷Rg1对照品(批号0703-200118)均购于中国药品生物制品检定所；硅胶G(批号060412)为青岛海洋化工有限公司生产；其他所用试剂均为分析纯；参蓉壮骨胶囊由广东省英德市中医院制剂室生产,批号为2007010801、2007010802、2007010803；阴性对照品制剂按制剂处方工艺缺味配制，所用药材均符合《中国药典》(一部)2005年版规定。

　　2方法及结果

　　2.1当归薄层色谱鉴别

　　取参蓉壮骨胶囊内容物6g，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。同法取缺当归的阴性对照品制成缺当归阴性对照品溶液。另取当归对照药材，加甲醇10ml，同法制成对照药材溶液[1]。

　　2.1.1专属性

　　吸取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(4：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，结果未见阴性对照溶液对鉴别有干扰。

　　1.供试品(2007010801)2.供试品(2007010802)3.供试品(2007010803)4.当归对照药材5.缺当归阴性对照

　　2.1.2耐用性

　　不同温度的比较：取点样后的薄层板，分别在6℃和14℃的层析缸中展开，取出,晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果表明在6℃～14℃范围内试验，对鉴别无明显的影响。

　　1.供试品(2007010801)2.当归对照药材

　　不同湿度的比较：取点样后的薄层板，分别在用硫酸调节相对湿度32%和72%的层析缸中展开，取出,晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果表明在相对湿度32%～72%范围内试验，对鉴别无明显的影响。

　　1.供试品(2007010801)2.当归对照药材

　　经上述方法学验证，结果表明温湿度变化对展开效果影响不大，因此，认为本方法的耐用性良好。

　　2.2三七薄层色谱鉴别

　　取参蓉壮骨胶囊内容物6g，加乙醚20ml，超声处理10分钟，滤过，药渣挥干乙醚，加甲醇20ml，加热回流20分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次15ml，取正丁醇提取液，用氨试液20ml洗涤，再用正丁醇饱和的水溶液洗涤2次，每次20ml，正丁醇浓缩至干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；按处方及制法制成缺三七的阴性对照样品，取相当于供试品的量，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液；另取三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液[2]。

　　2.2.1专属性

　　吸取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果未见阴性对照溶液对鉴别有干扰。(见图4)。

　　图4三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品薄层鉴别

　　1.供试品(2007010801)2.供试品(2007010802)3.供试品(2007010803)4.三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品的混合液5.缺三七阴性对照

　　2.2.2耐用性

　　不同温度的比较：取点样后的薄层板，分别在6℃和16℃的层析缸中展开，取出,晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，结果表明在6℃～16℃范围内试验，对鉴别无明显的影响。(图5)。

　　1.供试品(2007010801)

　　2.三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品的混合液

　　不同湿度的比较：取点样后的薄层板，分别在用硫酸调节相对湿度为32%和72%的层析缸中展开，取出,晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。结果表明在相对湿度32%～72%范围内试验，对鉴别无明显的影响。(见图6)。

　　1.供试品(2007010801)

　　2.三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品的混合液

　　经上述方法学验证，结果表明温湿度变化对展开效果影响不大，因此，认为本方法的耐用性良好。

　　3讨论

　　3.1上述2种药材成分的提取、薄层色谱所用的展开剂，均是在参考了有关资料的基础上经过多次试验筛选后得出的。

　　3.2从上述试验的结果可以看出：2种药材采用薄层色谱鉴别方法，展开及分离效果良好，阴性对照无干扰，温湿度变化对展开效果影响不大，方法简便、快捷，重现性好，可对成品制剂中所含的当归以及三七所含主要有效成分进行有效检识。