超临界CO2流体萃取法与水蒸气蒸馏法提取肉豆蔻挥发性化学成分的研究

　　摘要：采用临界CO2萃取法与水蒸气蒸馏法从肉豆蔻中提取挥发油，用气相色谱-质谱联用技术测定其化学成分，对两种提取办法所得的挥发油进行比较。水蒸气蒸馏法提取挥发油主要成分为β-蒎烯、松油烯4-醇、d-旅烯、 γ-松油烯、β-水芹烯等；超临界CO2萃取法提取的挥发油主要成分为：肉豆蔻酸、肉豆蔻醚、松油烯4-酶、d-烯、黄樟醚等。

　　关键词： 肉 蔻 超临界流体萃取 水蒸气蒸馏 气相色谱-质谱

　　肉豆蔻为肉豆蔻科植物肉豆蔻Myristica iragrans Houtt．的干燥种仁。主产于马来西亚及印度尼西亚、斯里兰卡、西印度群岛等地。我国云南、广东、台湾也有引种：肉豆蔻的果实除作药用外，还是著名的香料和调味品。肉豆蔻温中行气，涩肠止泻。用于脾胃虚寒，久泻不止，脘腹胀痛，食少呕吐 ，肉 蔻对于由前列腺素E，和E，增加引起的水肿及炎症有明显的抑制作用 。肉豆蔻含有毒成分肉豆蔻醚及黄樟醚，服用过量，可引起眩晕、谵妄、肝脏脂肪变性而致死 ：对于肉豆蔻挥发油化学成分的分析虽已有报道 。但鉴定的成分较少，而对超临界CO2莘取的肉豆蔻挥发油成分的分析研究尚未见报道。本文采用了超临界流体萃取技术 (SFE-CO2)和水蒸气蒸馏法(SD)分别提取了肉豆蔻挥发油，用气相色谱一质谱联用技术鉴定了挥发油的化学成分。在超临界CO2萃取的肉豆蔻挥发油中共鉴定出48种化合物，在水蒸气蒸馏法提取的挥发油中共鉴定出38种化合物，分别占挥发油总成分的78％以及90％以上。以归一化法计算各个峰的相对含量。

　　1 仪器与试药：HP-GC-5890-5970BMSD型色谱-质谱联用仪(美国Hewlett Packard公司)；SPEed SFE型超临界萃取仪(美国Applied Separations公司)；GC-9A型气相色谱仪(日本岛津)；C．R2A型数据处理系统(日本岛津)。肉豆蔻购自山东省药品采购供应站，经山东大学生命科学院郑亦津教授鉴定。

　　2 肉豆蔻挥发油的提取

　　2．1 水蒸气蒸馏法：将肉豆蔻粉碎后用挥发油提取器按中华人民共和国药典2000年版一部附录XD挥发油测定法项下甲法提取挥发油，经无水硫酸钠干燥后得挥发油，得油率为6．1％ ，挥发油为淡黄色透明油状液体，具有特殊浓郁嗅味。

　　2．2 超临界CO2萃取法： 将20g肉豆蔻粉碎后加入50ml超临界CO2萃取池中。压力15MPa，萃取池温度50℃ ，接收池温度30℃。动态萃取30min，得淡黄色透明油状物，有浓郁嗅味，得油率为1 1．7％ 。

　　3 气相色谱分析条件：色谱柱： 英毛细管柱sE-54(30m ×0．25 mm，0．25μm)；色谱往程度升温条件：柱温60℃(10min),6℃/min→ 260℃ (50min)；载气He；分流比1：30；柱前压为43 kPa；气化室及检测器温度均为280℃ 。

　　4 气相色谱-质谱分析条件：色谱法：石英毛细管柱sE-54(30 m×0．25 mm，0．25μm)；色谱柱程序升温条件：柱温60℃(10min),6℃/min→ 260℃ (50min)；载气 He，分流比1： 30；柱前压为43kPa；接口温度280℃ ；离子源温度230℃；电离电压70V；扫描质量范围30-400AMU。

　　5 结果与讨论

　　按上述实验条件，对肉豆蔻挥发油进行分析，采用气相色谱数据处理系统，以峰面积归一化法测得挥发油各组分相对含量。

　　对总离子流图中的各峰经质谱扫描后得质谱图，经过质谱数据系统检索(质谱数据库NIST)，人工谱图解析，并查对有关质谱资料 ，从基峰相对丰度等几个方面进行直观比较，从而确定出肉豆蔻挥发油中的化学成分。

　　水蒸气蒸馏法提取的肉豆蔻挥发油共分离出42种化合物，鉴定了其中的38种。已鉴定的化合物组分占总馏出组分的90％ 以上，占色谱总馏出峰面积的97％ 以上。在水蒸气蒸馏法提取的肉豆蔻挥发油中，含量最高的组分是β-蒎烯，相对含量36．18％ ，其次为松油烯4-醇，相对含量l1．12％ 、α-蒎烯，相对含量7．63％ 。相对含量较高的还有 γ-松油烯(5．90％ )、β-水芹烯(4．89％)、D柠檬烯(4．78％)、4-蒈烯(3．97％)等。在已鉴定的化合物中含量较高的4-蒈烯、2-蒈烯以及薄荷醇、香叶醇等l5种组分未见在该药材中报道过。

　　超临界CO2萃取法提取的肉豆蔻挥发油中，共分离出61种化合物，鉴定了其中48种，已鉴定的化合物组分占总馏出组分的78％ 以上，占色谱总馏出峰面积的98％ 以上。在已鉴定的组份中，含量最高的组分是肉豆蔻酸，相对含量24．3l％ ，其次为肉豆蔻醚，相对含量19．50％ 。相对含量较高的还有松油烯41-醇(4．76％ )、α-蒎烯(3．34％)、黄樟醚(2．93％)等。在已鉴定的化合物中有4-蒈烯、乙酸龙脑酯、异丁香酚甲基醚、花生酸等20多种组分未见在该药材中报道过。

　　由表中可知，在水蒸气蒸馏法与超临界CO2萃取法所得肉豆蔻挥发油中，有24种成分相同，但各成分的含量有差异；相同组分主要为分子量在178以下的小分子量化合物。两种方法提取的挥发油中低挥发性组分相差不大，如：α-蒎烯、β-蒎烯、松油烯4-醇等含量较高的组分。不同组分主要是分子量在178以上的化合物。在超临界CO2萃取法所得挥发油中，大分子量的成分相对较多，包括较多的醇、酯、不饱和脂肪酸等成分以及水蒸气蒸馏法未能提出的肉豆蔻酸、9-十八碳烯酸、花生酸、长链脂肪烃等。

　　参 考 文 献

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　　4 江苏新医学院．中药大辞典．上海：上海科学技术出版社，1986：394

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