反相高效液相色谱法对利巴韦林片的含量进行测定

　　摘要：利巴韦林是广谱强效的抗病毒药物，目前广泛应用于病毒性疾病的防治。在临床上主要用于治疗病毒性上呼吸道感染、疱疹、麻疹、流行性出血热、病毒性肝炎、病毒性腹泻等。利巴韦林片已被中国药典2005年版收载。

建立了利巴韦林片的含量RP-HPLC方法。方法：采用DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,水为流动相,检测波长:207nm。结果：利巴韦林浓度在20.168～80.672μg/ml范围内,峰面积与浓度呈良好线癫痫是一种需要长期用药来控制症状的慢性疾病，患者在选择治疗药物时自然希望疗效最大化，副作用最小化。尤其是对于儿童癫痫患者，家长往往担心长期使用西药会对患儿的身体、智力发育产生影响，相对而言，更倾向于选择所谓的“偏方秘方”、“纯中药制剂”。然而，近年来某些厂家生产称纯天然、纯中药保健食品为增强产品功效，非法添加化学成分，通过中药的多组分来掩盖西药成分。卡马西平为一种临床常用的抗癫痫药物，对精神运动性发作，大发作、局限性发作和混合型癫痫具有显著疗效，尤为适宜减轻精神异常和伴有精神症状的癫痫。本文通过使用液质联用方法，实现了对中成药中非法添加的卡马西平快速定性分析。

【关键词】利巴韦林;利巴韦林片;反相高效液相色谱法

本文参考有关文献[1～6],建立了反高效液相色谱法(RP-HLPC)测定利巴韦林片含量的方法,实验结果表明，该法操作简便、专属性强、灵敏度高、准确性好,能有效控制利巴韦林及其制剂的质量。

1仪器与试药

Agilent1100型高效液相色谱仪;TU-1901紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);利巴韦林对照品:由中国药品生物制品检定所提供(629-200202)。利巴韦林片(自制批号:090601、090602、090603规格为20mg);利巴韦林片(四川美大康药业股份有限公司，批号为0904036);水为离子交换水。

2方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：DiamonsilC18(250mm×4.6mm,10μm);流动相：水;流速：1.0ml/min;检测波长：207nm;柱温：室温;进样量：10μl，理论板数以利巴韦林峰计不得低于2000。

2.2系统适用性试验

分别将空白溶液、对照品溶液和样品溶液进样后,可见空白辅料无干扰,本色谱条件,可用于利巴韦林的含量测定。见图1

2.3线性关系考察

精密称取利巴韦林对照品50.42mg,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀;精密量取2、3、4、5、6、7、8ml分别置50ml量瓶中,加水稀释至刻度;精密量取10μl,注入液相色谱仪,记录色谱图,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,得回归方程:Y=-32.5412C-0.4753,R=0.99999(n=7)。结果表明，利巴韦林在20.168～80.672μg/ml浓度范围内,呈良好的线性关系。

2.4回收率试验

精密称取利巴韦林原料约40mg、50mg、60mg,各3份,置100ml量瓶中,水溶解并稀释至刻度,分别吸取上述溶液适量,用流动相定量稀释成每1ml约含40μ,50μ和60μg的溶液,精密量取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另取利巴韦林对照品,用流动相定量稀释成每1ml约含50μg的溶液,同法测定。计算每份的回收率,结果见表1。表1回收率试验结果

2.5精密度试验

取样品(批号:060901),按照“样品测定”项下的方法配置成样品溶液，连续进样5次,记录峰面积，RSD=0.52%(n=5)。结果表明，本含量测定方法的精密度良好，符合方法学要求。

2.6稳定性试验

取样品(批号:060901),按照“样品测定”项下的方法配置成样品溶液，并于室温下放置0、8、12、24小时后测定,峰面积积分值基本不变,RSD=0.74%(n=4)。结果表明，细胞出现细胞凋亡，从而抑制T细胞的增殖。Chan等[11]研究指出其体外对T细胞的增殖抑制作用及对IFN-γ产生的抑制作用要明显强于FK506的作用。T4在体外0.01μg/ml及0.1μg/ml浓度时，可显著抑制T细胞增殖;小剂量T4在体内可明显抑制ConA激发的T细胞增殖反应。

3结束语

深入研究雷公藤活性成分的生物药剂学和药动学特点，找出最佳的治疗浓度和最小中毒剂量，据此设计靶向、缓控释等新型制剂和给药方案，使其血药浓度控制在有效范围之内，对于雷公藤制剂广泛深入的临床应用意义重大。

(来源：中国化工仪器网)