双波长分光光度法

Dual-wavelength spectrophotometry，简称双波长法

需利用双波长分光光度计来实现的一种分光光度法。其原理是：波长分别为l1和l2的两束单色光交替通过同一盛有试样溶液的吸收池，通过在l1和l2处测得的吸光度差ΔA，由朗伯-比尔定律测定试样中的被测组分，即 式中el2和el1分别表示在波长l2和l1处待测物质的摩尔吸光系数，b和c分别表示吸收池的光程(cm)和待测物的摩尔浓度。该法成败的关键是l2(通常称测定波长)和l1(通常称参比波长)的组合和选择。双波长法消除了传统单波长分光光度法中制备参比溶液及因样品池和参比池不匹配而引起的误差，可用于浑浊试样分析以及两组分或三组分混合物的同时测定。在l2和l1波长差1~2nm时，采用双波长同时扫描，还可记录一阶导数光谱。