高效液相色谱法用于西洋参与白参的分析和鉴别

西洋参为五加科植物西洋参(Panax quinquefolium L．)的干燥根．原产于美国和加拿大．本世纪7O年代以来，在我国许多地区大面积引种、栽培并取得成功．人参和西洋参为同科同属植物，两者的外形基本相似，但由于性味、功效的不同，中医临床上区别应用．近年来，西洋参的使用量大增，且价格昂贵，市场上不断出现用人参加工后充当西洋参出售，用传统的外观鉴别法极不易区别．因此有必要建立一个能准确、灵敏、快速分析西洋参质量的方法．西洋参总皂苷是西洋参的主要有效成分．其中人参皂苷．Rb 又是西洋参主要特征性成分，其含量高于人参．也是西洋参与人参鉴定的主要依据．卫生部部颁的定性分析方法为薄层层析法；但该法操作比较繁琐、费时，条件要求比较严格．本文采用高效液相色谱法，以乙腈-水(30：7o)为流动相，紫外203 rim检测．测定西洋参与人参中人参皂苷 Rb1的含量并利用谱峰的差异对两者进行定性比较，从而达到控制西洋参质量的目的

1 仪器与试药
美国PERKIN—ELMER公司高效液相色谱仪；紫外一可见检测器LC 295：1022型数据处理机；Sep．Pak q8 Cartridge(Waters)；乙腈为色谱纯：人参皂苷．Rb1由卫生部生物制品检定所及沈阳药科大学天然药物化学教研室提供；其它试剂均为分析纯规格；水为去离子水．

2 方法与结果
2．1 色谱条件
采用Hypersi1．C18ODS柱(4．6mm× 250 mm)(大连依利特科学仪器有限公司)．比较不同溶剂系统，采用乙腈．水(30：70)为流动相，可较好分离出待测成分；其它条件为：流速l ml／
min．柱温40℃．纸速3mm／min，检测波长203nm．以峰面积定量．
2．2 检测波长的选择
测定了人参皂苷Rb1在流动相中的紫外吸收光谱，在紫外区的最大吸收波长为203 nm，故选用该波长进行检测．
2．3 线性试验
取人参皂苷Rbl对照品适量．加甲醇制成1mL含1．00mag的溶液，分别进样4，8，12，16，20μL，测定峰面积，以人参皂苷．Rb1(mg)为横坐标(X)，积分值为纵坐标(Y)，进行线性回归，得回归方程Y = 一72 342 + 220 915 775X．r = 0．999 5．结果表明，在选定的浓度范围内(4-20 μg)，标准曲线线性关系良好，符合用外标法定量测定要求。
2．4 精密度试验
取线性试验项下溶液，每次进样12μ L，进样5次，根据峰面积计算，RSD=1．63％ ．
2．5 回收率试验
精密量取对照液置5份西洋参药材中，按样品测定法测定含量，结果见表1．
2．6 样品含量测定
取已干燥、恒重的样品l g，精密称定，水煎煮3次，每次加水25mL，第一次煎煮3 h，第二次煎煮2 h，第三次煎煮i h，合并水煎液．减压浓缩约25 mL，转移至25 mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀取2．5 mL通过Sep．Pak C18预处理柱，分别用水5 mL，30％ 甲醇10 mL和甲醇5 mL洗脱，甲醇洗脱液转移至5 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度．精密吸取适量注入液相色谱仪，测定峰面积，按外标计算，结果见表2
2．7 样品的定性鉴别
以人参皂苷Rb1为基准物，计算各主要人参皂苷的相对保留时间，并将各人参皂苷的相对含量(A*／A )列于表3 ，

2 讨论
a．本文采用水煎煮法提取人参皂苷，水煎液直接通过Sep-Pak cl8预处理柱净化处理，简化了手续，提高了效率，方法快速，重现性好．
b．用水煎法提取人参皂苷，提取渡中存在大量糖和少量色素，对测定有干扰曾用水饱和正丁醇多次萃取去除杂质，但效果不明显．后改用Sep-Pak Cl8固相萃取法，效果良好．
c．以标准品对照，采用高效渡相色谱的相对保留时间和相对含量对西洋参及人参提取渡中各主要人参单体皂苷定性分析．