气质联用技术分析鲟鱼肝油软胶囊中脂肪酸组成

【核心介绍】对市售鲟鱼肝油软胶囊中的脂肪酸化合物成分进行研究。通过甲酯化反应，以正己烷为溶剂直接进样，采用气相色谱-质谱联用技术对脂肪酸甲酯成分进行分离并辅助NIST检索工具分析成分。结果表明鲟鱼肝油软胶囊中主要含有棕榈酸、亚油酸、亚麻酸、硬脂酸等13种脂肪酸。通过面积归一化法计算出各种脂肪酸相对含量，其中不饱和脂肪酸含量接近80%。该实验方法简便快捷，可为同类产品脂肪酸含量研究提供借鉴。 　

气质联用技术分析鲟鱼肝油软胶囊中脂肪酸组成

钱宗耀 华震宇 李静

（新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所/农业部农产品质量安全风险评估实验室（乌鲁木齐） 新疆乌鲁木齐 830091）

摘要 对市售鲟鱼肝油软胶囊中的脂肪酸化合物成分进行研究。通过甲酯化反应，以正己烷为溶剂直接进样，采用气相色谱-质谱联用技术对脂肪酸甲酯成分进行分离并辅助NIST检索工具分析成分。结果表明鲟鱼肝油软胶囊中主要含有棕榈酸、亚油酸、亚麻酸、硬脂酸等13种脂肪酸。通过面积归一化法计算出各种脂肪酸相对含量，其中不饱和脂肪酸含量接近80%。该实验方法简便快捷，可为同类产品脂肪酸含量研究提供借鉴。

关键词 鲟鱼肝油；脂肪酸；气质联用

中图分类号 TH843

Determination of  Fatty Acids Composition From Cod liver Oil Soft Capsules by Gas Chromatography Mass Spectrometry

Qian Zongyao,Hua Zhenyu,Li Jing

(Institute of Agricultural Quality Standards and Testing Technology Research,Xinjiang Academy of Agricultural Science,Laboratory of quality& safety risk assessment for agro-products(Urumqi),Ministry of agriculture,Urmqi 830091,China）

Abstract This paper studied fatty acid compounds from commercially available sturgeon cod-liver oil soft capsule. Through esterification reaction, using hexane as solvent directly into the sample, using thetechnology of gas separation of fatty acid methyl ester composition and composition analysis of NIST helper tools to retrieve chromatography-mass spectrometry. The results showed that cod liver oil soft capsule is mainly composed of palmitic acid, linoleic acid, linolenic acid, stearicacid, 13 kinds of fatty acids. The relative content of fatty acid was calculated by area normalization method, the content of unsaturated fatty acid is close to 80%. The method is simple and fast, which can provide reference for the similar products of fatty acid content.

Key words Cod liver Oil;Fatty acids;GC-MS

鳕鱼肝油含有大量不饱和脂肪酸，它是构成体内脂肪的一种脂肪酸，也是人体必需的脂肪酸之一，它具有调理血脂、清理血栓、补脑健脑等功能^[1]。气相色谱法是目前广泛用于分析各类样品中脂肪酸组分的方法，目前已有该类样品脂肪酸的分析报道^[2-3]，但气相色谱在缺少标准物质时难以全面彻底的分析脂肪酸组分，因此气相色谱-质谱联用技术的诞生能很好的解决此类问题。本文应用气相色谱-质谱联用技术对鲟鱼肝油软胶囊中脂肪酸的种类和含量进行分析测定，该方法简便快捷，色谱分离完全，专属性好。

1 实验

1.1 仪器与试剂

1.1.1 试验对象

市售鲟鱼肝油软胶囊，Kidskit原产地美国。

1.1.2 主要试剂

石油醚，由天津光复精细化工研究所生产，为分析纯；正己烷、甲醇，由Fisher Scientific公司生产，为色谱纯；氢氧化钾，由天津盛奥化学试剂厂生产，为分析纯。

1.1.3 主要仪器

气相色谱—质谱联用仪，配电子轰击离子源，由Perkin Elmer公司生产；分析天平，由Mettle-Toledo公司生产；旋转蒸发仪，由EYELA公司生产。

2. 测定方法

2.1 脂肪酸甲酯化

取1mL鲟鱼肝油软胶囊中液体，加入2.5mL的氢氧化钾-甲醇（2mol/L）溶液进行脂肪酸甲酯化，加入正己烷进行脂肪酸甲酯萃取，静置分层后，取上层有机相（正己烷）适当稀释后用微孔滤膜(0.45μm）过滤后进行气相色谱—质谱仪器进样分析。

2.2 气相色谱仪器条件

色谱柱：FFAP（30m×0.25mm×0.5μm）；载气：氦气（99.999%）；流速：1.0mL/min；进样：2.0μL，分流比1:10；进样口温度：250℃；程序升温：初始温度80℃，以10℃/min升温至230℃，保持15min；

2.3 质谱仪器条件

离子化方式：电子轰击（EI）；离子化能量：70 eV；离子源温度：230℃；质量分析器：单四级杆；传输线温度270℃；溶剂延迟：3min；扫描范围：50～450amu；扫描方式：全离子扫描（SCAN）。

2.4 测定结果

鲟鱼肝油中脂肪酸化学组分定性定量分析是通过气相色谱—质谱联用仪器进行化合物的全离子扫描。采用仪器的化学工作站数据处理系统同时配有NIST2011谱图库进行化合物质谱解析，匹配鲟鱼肝油中各种脂肪酸的化学结构。用归一化面积百分比法定量计算各脂肪酸的相对百分含量。

3 分析结果

3.1 鲟鱼肝油软胶囊样品中脂肪酸的化学成分分析

根据仪器分析结果可以确定出鲟鱼肝油胶囊中各脂肪酸甲酯的化学成分。由色谱工作站得到的总离子流图见图1。

图1 鲟鱼肝油胶囊的脂肪酸甲酯总离子流色谱图

由实验得出的化学成分经鉴定的结果与面积归一化法定量所得到的相对含量见表1。鲟鱼肝油软胶囊中含有约13种脂肪酸，其中不饱和脂肪酸含量接近80%，各脂肪酸种类的对比见图2。

表1  鲟鱼肝油软胶囊中脂肪酸甲酯化学组分及含量

（n=3）

序号	保留时间	化学成分 （脂肪酸甲酯）		相对百分含量% （n=3）
1	10.43	C14:0	肉豆蔻酸甲酯	6.25
2	10.95	C15:0	十五烷酸甲酯	0.28
3	12.41	C16:0	棕榈酸甲酯	13.02
4	12.66	C16:1	棕榈油酸甲酯*	11.68
5	14.22	C18:0	硬脂酸甲酯	1.97
6	14.41	C18:1(Z)	油酸甲酯*	14.21
7	14.47	C18:1(E)	油酸甲酯*	5.43
8	14.81	C18:2	亚油酸甲酯*	0.64
9	15.38	C18:3	亚麻酸甲酯*	0.20
10	16.19	C20:1	花生一烯酸甲酯*	19.35
11	18.35	C20:5	EPA*	10.01
12	18.75	C22:1	芥酸甲酯*	12.23
13	22.97	C22:6	DHA*	4.74

*为不饱和脂肪酸

图2 脂肪酸含量对比图（SFA：饱和脂肪酸；MUFA：单不饱和脂肪酸；PUFA：多不饱和脂肪酸）

4 结论及讨论

本文建立了气相色谱-质谱联用法测定鲟鱼肝油软胶囊中脂肪酸的含量，其中不饱和脂肪酸含量接近80%，各脂肪酸种类的对比见图2。该方法专属性好，可作为测定同类产品中脂肪酸含量的方法。目前归一化法测定脂肪酸含量已不能满足定量的检测要求，今后将进一步研究以内标物进行绝对定量的测定方法。

参考文献

[1] 周小刚,郭利萍.富含不饱和脂肪酸油类软胶囊氧化情况的研究[J].食品科技,2013,38(09):58-60

[2] 林虬,宋永康,苏德森,等．气相色谱法分析鱼油胶囊中的脂肪酸组成[J]．现代科学仪器,2005(1):63-64

[3] 刘河疆,周晓龙,钱宗耀,王建梅,安冉,孙婷,王成,等.气相色谱法快速测定姬松茸中脂肪酸[J].现代科学仪器,2014(4):137-139